Inflamación: efecto antiinflamatorio del CBD en modelos caninos de inflamación

Efecto del cannabidiol (CBD) en la respuesta inflamatoria canina: un estudio ex vivo en sangre completa estimulada con LPS

Gugliandolo, P. Licata, AF Peritore, R. Siracusa, R. D'Amico, M. Cordaro, R. Fusco, D. Impellizzeri, R. Di Paola, S. Cuzzocrea, R. Crupi and CD Interlandi

2021

CONCLUSIONES CLAVE:

• El TNF-α es una molécula proinflamatoria con expresión aumentada y presente en altos niveles patológicos en la dermatitis atópica canina
• La producción de IL-6 (molécula proinflamatoria) se potencia en la dermatitis atópica y su bloqueo puede ayudar a mejorar esta enfermedad
• Tanto el TNF-α como la IL-6 están asociados con la patogenia de la artritis en perros
• El CBD redujo la secreción de TNF-α e IL-6 (moléculas que impulsan la respuesta inflamatoria) en un modelo ex vivo de inflamación en células sanguíneas caninas
• La proporción de TNF-α a IL-10 (molécula proinflamatoria) es un marcador del equilibrio entre los niveles proinflamatorios y antiinflamatorios clave
• El tratamiento con CBD restauró la relación TNF-α a IL-10 a un equilibrio saludable
• El CBD también redujo la activación de NF-κB (NF-κB es un regulador de la respuesta inflamatoria y de muchas citocinas proinflamatorias)
• Finalmente, la administración de CBD a las células inflamadas resultó en una expresión más baja de COX-2 (que está regulada al alza en la inflamación)

OBJETIVOS E HIPÓTESIS → El objetivo del estudio fue investigar las propiedades antiinflamatorias e inmunomoduladoras del CBD directamente en perros.

MÉTODOS → El estudio utilizó un modelo ex vivo en el que se estimuló sangre completa de perros sanos con LPS (evoca un entorno proinflamatorio, lo que permite caracterizar el efecto del CBD en la respuesta inflamatoria canina). Se obtuvieron muestras de sangre completa de 6 perros sanos y se agregaron directamente a diferentes medios:

1. Control: sangre entera + vehículo (DMSO 0,1%)
2. LPS: sangre completa + LPS 100 ng/mL + vehículo (DMSO 0,1%)
3. CBD 50 μg: sangre entera + LPS 100 ng/mL + CBD (kanarescue 5% en DMSO 0,1%) 50 μg/mL
4. CBD 100 μg: sangre entera + LPS 100 ng/mL CBD (kanarescue 5% en DMSO 0,1%) 100 μg/mL

Luego, el estudio se centró en los niveles de las principales moléculas reguladoras. IL-6 y TNF-α son las principales citocinas (moléculas/factores) proinflamatorias que impulsan la respuesta inflamatoria y la activación de las células inmunitarias; juegan un papel clave en la respuesta inflamatoria fisiológica, como durante la infección, pero también en varias enfermedades en las que los niveles elevados de estas citocinas se asocian con un resultado clínico deficiente. IL-10 es una citoquina antiinflamatoria y un mediador inmunorregulador. El equilibrio entre TNF-α e IL-10 es importante para el mantenimiento de la homeostasis inmunitaria; comúnmente, un aumento en TNF-α es contrarrestado por un aumento simultáneo en la citocina antiinflamatoria IL-10, que suprime la producción de muchos mediadores reguladores y de activación. Además, el estudio evaluó el efecto del CBD sobre Nf-κB (regulador clave de la respuesta inflamatoria que regula la expresión de varios mediadores proinflamatorios) y la expresión de COX-2. La COX-2 juega un papel fundamental en la cascada inflamatoria y, por tanto, en la inflamación aguda y crónica.

RESULTADOS → Cuando se realizó estimulación con LPS en presencia de CBD (50 y 100 μg/mL) hubo una reducción significativa en la secreción de citocinas. El estudio observó un efecto de dependencia de la dosis de CBD; en comparación con CBD 50 μg/mL, la dosis de CBD 100 μg/mL produjo un mayor efecto inhibitorio sobre la liberación de IL-6 y TNFα en el sobrenadante de sangre completa.

Gráfico 1: Niveles de IL-6 y TNF-α tras estimulación con LPS 100ng/mL y con uso concomitante de CBD a diferentes dosis (50 y 100 ng/mL)

Al evaluar la proporción de TNF-α a IL-10 como un marcador de citocinas del equilibrio entre los niveles proinflamatorios y antiinflamatorios clave, los resultados muestran que la estimulación con LPS produce un aumento significativo en la proporción de TNF-α a IL-10 en todo el perro sangre, mientras que el tratamiento con CBD es capaz de restaurar la relación TNF-α a IL-10 en comparación con los grupos de control. Finalmente, los estímulos con LPS indujeron un aumento en la activación de Nf-κB p-65, mientras que hubo una reducción en la expresión de Nf-κB para los grupos incubados con LPS y CBD. Además, los niveles de COX-2, que se sabe que aumentan durante la inflamación, aumentaron en el grupo LPS. El grupo de tratamiento con CBD (50 y 100 μg/mL) mostró una expresión de COX-2 significativamente más baja en comparación con LPS.